western blot 一抗孵育,为什么不可以将一抗和分析的蛋白样品一起先孵育,后page 电泳,这样更节约一抗?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/20 11:54:10

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western blot 一抗孵育,为什么不可以将一抗和分析的蛋白样品一起先孵育,后page 电泳,这样更节约一抗?
在SDS-PAGE电泳前,一般样品加入上样缓冲液中并煮沸5~10分钟,让蛋白样品变性并带上一定电荷,使蛋白迁移速度只与分子量相关,这样才能将不同的蛋白通过电泳尽量的区分开来.这个过程中,会打断一些分子间的相互作用,包括抗体和蛋白样品间的相互作用,也许是没人这么做的原因.

western blot孵育一抗的时候可以同时孵育多个一抗么? western blot 一抗孵育,为什么不可以将一抗和分析的蛋白样品一起先孵育,后page 电泳,这样更节约一抗? western blot 抗体孵育盒哪里有卖 western blot 封闭液中直接加一抗孵育可以吗? western blot中,封闭液封闭完成后,需要用PBS或PBST洗涤滤膜,然后进行一抗孵育,在一抗孵育完成后为什么要清洗滤膜上的磷酸盐,磷酸盐对后续的加入二抗有什么影响?一抗孵育完成后,我是知道洗 做western blot 的一抗孵育的原理是什么啊?如具体的分子机理,不同的蛋白质又如何选择一抗的?而一抗怎么识别蛋白的? western blot的一抗和二抗是如何作用的? western blot 转膜之后用丽春红进行染色,可以看到条带都转过去了~但是最后做不出来~室温封闭两个小时,一抗1:600孵育过夜,二抗室温一个半小时,一抗二抗用斑点杂交验证过了效价没问题,一抗 western封闭膜以后,不能马上孵育一抗,把膜放在4度环境下,2天, western blot的一抗、二抗可以重复用么?一般可以用几次? western blot中选择什么厂家的一抗比较好,根据什么选择的? Western Blot实验中叠氮钠的作用是什么?如果多次加一抗,如何洗净前面的一抗? western blot 一抗浓度高和低出现什么结果 求一Foxp3的 western blot 的结果.电泳图 什么是Western Blot? western blot的具体步骤? western blot 具体操作步骤 western blot 的目的