载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/16 18:24:39

载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗?
载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗?

载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗?
cicelyzh(站内联系TA)要根据距离和哪种限制酶的情况而定.有些能切开,有些不行.jwucn(站内联系TA):hand:.帮您顶一个.:hand:zqxabc(站内联系TA)可以的,临近的两个酶切位点可以分步酶切,一个一个切,先切一个,然后不跑胶直接加Binding buffer过柱洗脱,回收产物再进行下一个酶切.因分步酶切有损耗,所以质粒的量可以增加以保证回收浓度joan198108(站内联系TA)尽量不要,临近位点可能导致一个酶的结合影响另一个酶的结合,还有就是有些酶需要的结合片段较长,分步酶切后也不一定能够实现山水88(站内联系TA)可以的话把序列放上来大家给你分析吧...山雨(站内联系TA)这样子不好,酶切的效果好需要一定长度是保护碱基,挨着的位点切不动,分步切的话,buffer不一样,效果也非常一般,建议在引物上加酶切位点,这样就不受载体的限制了.cory0931(站内联系TA)on yr re:
质粒的两个酶切位点,紧挨着的话,势必会影响双酶切效果,原因是:
内切酶结合时,一般都是需要微点周围有多余碱基,否则影响结合;
再者,酶切后的粘性末端不余怒重合;
若是连个酶切位点之间有几个碱基的间隔,比如说6个以上,一般是可以的;
至少,也得间隔4个碱基吧;

载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗? 引物的设计原则t18载体和t18simple载体的酶切位点t18载体和t18simple载体的酶切位点,是不是可以做大部分基因的克隆载体呢? 有没有机构可以代做实验,设计EGFP融合表达载体构建的相关序列? 哪家公司可以代做实验,设计EGFP融合表达载体构建的相关序列? 共转染是将两个基因构建到一个载体上,再转染的意思吗,还是两个基因构建到两个载体,再将两个载体转染?但是质粒不相容啊,可以转两个质粒到同一细胞吗? 设计引物加哪个酶切位点pQE30表达载体上常用的酶切位点有BamHI、 SacI 、KpnI 、SmaI 、PstI、 HindIII ,现预克隆的一段基因上有EcoRI、HindIII、SacI、AccI、PstI等酶切位点,那么在设计引物时候可以在 表达载体构建的问题.我要用PBI121做表达载体,用他上面的35S做启动子,那么我的插入目的基因的启动子是不是要和表达载体上的启动子在一个编码区,设计引物时要怎么设计才能让PBI121上的启动 关于双元载体我还想再问一些,Ti载体和双元载体什么区别,若要做农杆菌转化的话,用哪个比较好啊,还是都可以用?前提是我有的是做基因枪转化的表达载体质粒. 用TAIL-PCR扩增转基因的侧翼序列,从两端扩结果都是载体上的序列我做的是转基因整合位点的检测,用的是TAIL-PCR技术,做载体线性化时用的是单酶切,在距离酶切位点300-500bp处的两端我分别设计 做sift(比例尺度不变特征变换) 在两个picture控件 图像上的特征点 可以用线连起来么?两个picture控件上的图像特征点 连起来,可以实现么? 通道蛋白和载体蛋白的区别,通常说的细胞膜上的载体蛋白是指载体蛋白和通道蛋白的总称吗?做题的时候如果题目里说载体蛋白应该怎么理解?通道蛋白是贯穿细胞膜的吗?载体蛋白可以贯穿细 临近,邻近这两个词语的意思 载体PET32a+与PET30a有什么区别?我用的是PET32a+做载体,但之前他们克隆基因时设计的载体是PET30.现在想知道这两种载体的区别,看看是不是要重新做. 机械臂设计电机选择本人想在一个活动物体(A)上做一个机械臂,来使另外一个活动物体(B)进行转位(控位置和姿态),二者为平面运动.由于两个活动物体是由气体浮动起来的,因此可以忽 表达载体与克隆载体的优缺点?那个是较理想的载体?如何设计》? 有的聚合酶在PCR产物的3,末端可以接上碱基A,易于与T载体连接,请问载体上的T碱基位于哪个末端?如果也位于3,端,似乎他们两个连不上啊 窗帘设计软件可以用起来很方便的吗? 哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点?现在需要连T,但是Pcr引物两端加了SacI和BamHI这两个酶切位点,所以需要找一个合适的T载体.