如何使用新版BLAST验证引物特异性

如何使用新版BLAST验证引物特异性 如何使用新版BLAST验证引物特异性 怎样用用NCBI验证引物的特异性 BLAST设计引物的问题?原来用Primer5.0设计引物,但是效果一直都不好,怀疑特异性不强,现在改用BLAST设计引物：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/,但是在这一步,,我不知道如何选择参数,我是做 BLAST引物特异性检测 ,中间细线代表什么,是不是中间有细线的越多越好? tm值与退火温度[求助]我想进行引物的特异性检验,进入primer-blast,怎么设置一些相关参数?我想进行引物的特异性检验,进入primer-blast,怎么设置一些参数?结果如何分析?直接在序列框中输入上空 primer 与BLAST 设计引物哪个好?设计引物遇到点问题,用primer 设计的引物,特异性不好.而用BLAST设计的引物又无法了解引物的一些特性.哪个更好呢?不知道用primer可不可以检测BLAST设计的引物的特 怎样用primer-blast设计引物 blast检验引物特异性NCBI上没有我所要物种的某基因序列,设计引物时我用人的序列做模版,想问下还有没有blast比对的意义,如果有该怎样去比对呢, 引物设计软件从哪搜索引物?很多引物设计软件里,选项是SEARCH,不明白从哪搜索的……还有blast验证引物是什么原理？是不是必须在NCBI里面有的序列才能验证？ 如何设计特异性引物我没学过分子方面的理论知识,但是现在我想做一个真菌的分子检测,就想设计一对引物进行特异性检测.要与其他不同的参考菌株做检测,那是不是在我使用软件设计引物的 逆转录PCR引物,在PUBMED上搜文献上找了一个引物,BLAST了一下,结果如下,但是自己不大会分析,求指导~BLAST（前2张图）和Primer-BLAST（最后一张）结果如下：不知道这样的结果特异性好不好,能不能 什么是PCR引物的特异性 pcr 引物特异性不好怎么办 怎么检验引物的特异性 如何设计随机引物我是想克隆一段 已经转入水稻基因组的 外源基因。打算设计一对引物 其5‘端使用随机引物，中间用特异性内切酶序列，3’端使用已知目的基因两端序列。（因为完全使 荧光定量PCR引物设计本人在做荧光定量PCR之前,先用Primer 3.0设计了目的基因的引物,用于半定量PCR,而且也把引物放入NCBI中进行了blast比对,得到引物为特异性引物,半定量PCR效果也跟预期一样,电 blast结果如何分析