呵呵,提取RNA过程?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/14 06:17:54

呵呵,提取RNA过程?
呵呵,提取RNA过程?

呵呵,提取RNA过程?
现在常用的是Trizol法.
提前将研钵、研棒、剪刀、镊子等用锡箔纸包好200度烘烤6小时,与实验前放到冰箱中预冷.枪头、离心管等DEPC水浸泡处理12小时后,高温灭菌30分钟(也可不用DEPC处理,常规高温灭菌40分钟),整个处理过程必须带手套(最好带口罩),否则环境中的RNA酶会降解RNA.
1、取鲜样或者在-80度保存样品,液氮研磨样品至细小粉末,0.1g样品加入1mlTrizol混匀,室温静置5分钟.
2、12000rpm离心十分钟,取上清至一新的离心管中,加入0.2ml氯仿剧烈晃动15秒,室温静置2-3分钟
3、12000rpm离心十分钟,取上清至一新的离心管中,加入等体积异丙醇,混匀,室温静置10分钟
4、12000rpm离心十分钟,去除上清,用70%乙醇清洗2次,7500rpm离心五分钟,晾干.(不可过分干燥否则不易溶解)
5、加入适量DEPC水溶解沉淀

偶是学化学的,帮不上什么忙。不过你说电泳没形成,也许是没形成胶体。呵呵一般提RNA是看不到沉淀的。 看到的沉淀不一定是RNA。可能是提取过程中