PCR问题-野生型条带条带出不来怎么办啊我是用拟南芥幼嫩叶片直接抽提DNA作为模板检测突变体背景的,第一次PCR后跑电泳时特异性条带和野生型条带都很清楚也很亮,但从第二次开始野生型条

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/30 03:36:09

PCR问题-野生型条带条带出不来怎么办啊我是用拟南芥幼嫩叶片直接抽提DNA作为模板检测突变体背景的,第一次PCR后跑电泳时特异性条带和野生型条带都很清楚也很亮,但从第二次开始野生型条
PCR问题-野生型条带条带出不来怎么办啊
我是用拟南芥幼嫩叶片直接抽提DNA作为模板检测突变体背景的,第一次PCR后跑电泳时特异性条带和野生型条带都很清楚也很亮,但从第二次开始野生型条带就时有时无的,特异性条带一直都有.我是用的三条引物一起P的,两两配对.引物没问题,Taq酶是自制的,退火温度是58度,请问这是怎么回事啊?

PCR问题-野生型条带条带出不来怎么办啊我是用拟南芥幼嫩叶片直接抽提DNA作为模板检测突变体背景的,第一次PCR后跑电泳时特异性条带和野生型条带都很清楚也很亮,但从第二次开始野生型条
首先,你从第二次实验开始结果不同,你是否确定第一次和后面的实验条件全部一样?试剂全部出自同一个试管/批次?
你把三条引物全部加在同一个试管中了么?如果是这样两种条带的产物可能对共用的引物产生竞争,比如,有可能其中一对引物与特异性的序列结合度比较高.而且你说了一个退火温度,有没有计算过这个温度是否对三条引物都适合,是不是比较接近其中一对引物的理想温度而造成这种条带差异.你可以先分开p一下看看.

PCR问题-野生型条带条带出不来怎么办啊我是用拟南芥幼嫩叶片直接抽提DNA作为模板检测突变体背景的,第一次PCR后跑电泳时特异性条带和野生型条带都很清楚也很亮,但从第二次开始野生型条 PCR产物条带浅怎么办 PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办 PCR后电泳是特异性条带,但测序总是出现结合问题.怎么办? ISSR标记,PCR产物电泳条带不清晰,怎么办 PCR预期目标条带大小 RAPD反应,DNA检测有条带,PCR没有条带,请问谁知道原因啊? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 PCR后进行DNA电泳跑的条带是一条,但不是我想要的条带,是怎么回事啊? RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了 PCR扩增不出来条带的原因? PCR产物跑胶有很多条带,但最亮的那个条带大小和我要的不一样,我想重做一次PCR,得怎么调整啊 关于PCR的问题:PCR如果目的基因扩增出来了是不是条带中的引物二聚体就没有了呀? 提取细菌DNA检测到有条带,PCR后无条带;而基因组DNA检测到无条带的,PCR后却有条带.怎么解释? realtime pcr 预实验的问题做realtime pcr 时,设计好引物后,用普通的pcr仪跑没有条带,是怎么回事啊?这样还能做realtime吗?排除引物设计的问题,因为是公司设计的. PCR目的条带的问题,cDNA模板没有问题,因为我的actin能跑出来.可是我的目的条带一直扩不出来,换了引物还是不管用.用别人肯定扩出来的引物去P,还是没有目的条带.这是为什么啊?