western杂交出现分子量大于和小于预期蛋白的条带'原因是什么啊'?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/10 14:24:31

western杂交出现分子量大于和小于预期蛋白的条带'原因是什么啊'?
western杂交出现分子量大于和小于预期蛋白的条带'原因是什么啊'?

western杂交出现分子量大于和小于预期蛋白的条带'原因是什么啊'?
实际上来说,Western并不能对蛋白质的分子量进行测定,它只是利用一抗二抗显色的步骤从凝胶上定性找到某一蛋白质.所以分子量大小还是在于电泳的过程.
首先,从电泳的原理上讲,它通过带电基团在电场中的移动来测定分子量,蛋白质的构象（空间形态）对这个影响很大,球蛋白就会比线形蛋白显的分子量小.而且marker同样有这个问题.
另外,对于western来说,多数都是从生物体中（细胞裂解液）做全蛋白电泳,然后特异性检测某一蛋白的存在,正因如此,蛋白质的一级结构就显的很重要了,毕竟你的预期蛋白是唯一的,而生物表达的蛋白可能就会存在或多或少的差异,分子量自然也就不会完全匹配预期.

很正常啊！抗体是别的只是目的蛋白上一小段序列，也就是俗称的抗原决定簇，这一小段序列其他蛋白也可能有，western的好处是结合了特异性识别加上分子量，这样就可以比较准确了，因为两个蛋白同时分子量相同又含有相同抗原决定簇的几率会非常小，所以western是生物学中一种金标准方法，相对免疫组化只能作为参考，没有western的结果，免疫组化的结果就不准确...

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很正常啊！抗体是别的只是目的蛋白上一小段序列，也就是俗称的抗原决定簇，这一小段序列其他蛋白也可能有，western的好处是结合了特异性识别加上分子量，这样就可以比较准确了，因为两个蛋白同时分子量相同又含有相同抗原决定簇的几率会非常小，所以western是生物学中一种金标准方法，相对免疫组化只能作为参考，没有western的结果，免疫组化的结果就不准确

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western杂交出现分子量大于和小于预期蛋白的条带'原因是什么啊'? Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别 Western杂交就是western blot 莫, 为什么western blot band条带的大小和预测的分子量大小不同? western bloy 半干转方法转膜时间控制?分子量是45kd和19kd .谢谢! 伯乐牌子的一套Western杂交仪器要多少钱,包括电泳仪,电泳槽和转膜槽在内 Western杂交这个名字中的western是怎么来的? western blot目的蛋白和内参分子量差距太大怎么办?而这没有办法在一张膜上, western 转膜 蛋白总是转不上PVDF膜?有时候还出现花膜跑胶的分子量大小是17kD 恒流转膜,90mA 3H,biorad的电转槽, 填大于小于和等于 填大于小于和等于 Dd和dd杂交会出现dd或Dd吗 做western之前怎样确定检测蛋白的分子量, 急需脑啡肽的分子量,做western blot用 硝酸纤维素膜/NC膜在哪里可以买到好的啊?用于Southern杂交和Northern杂交和Western印记杂交试验,请大家告诉我用过哪家的比较好, 做western转膜后,是按分子量把膜剪开吗?不同的分子量对应不同的因子 将某一基因进行重组表达,纯化重组蛋白制备抗体,用 Westen bIOt来 检测某一组织中该蛋白的表达水平,出乎意料的是除了预计的蛋白条带外,还分别发现了分子量大于和小于预期分子量的蛋白条 western blot 试验中蛋白转膜总是颜色很浅.分子量是27KD,电流和电压多少合适,应该转多长时间.