二次PCR产物,电泳条带与第一次PCR一样不明显,如何解决

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/29 13:13:31

二次PCR产物,电泳条带与第一次PCR一样不明显,如何解决
二次PCR产物,电泳条带与第一次PCR一样不明显,如何解决

二次PCR产物,电泳条带与第一次PCR一样不明显,如何解决
首先你的确认你没有用错东西.
如果没有问题,二次PCR的话,那得看你的延伸时间和退火温度了.
2轮的退火温度最好调高些,以增强特异性.
延伸时间上,看你的产物大小.如果需要大条带,那延伸时间意义不大,最好能对一轮产物进行预期条带的回收后再做2轮,或者进行巢式PCR；要是需要小条带那就简单了,直接缩短延伸时间就好了.

调整退火温度，或者是由于你的模板，引物被污染了。。排除外界干扰就是退火温度太高或者太低了。。

增加模板加量看看效果。

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