作业帮在做制备感受态细胞DH5a时,将含有pET-GFP的基因转化给了DH5a,转化后的DH5a确实能够在含Kan的平板上生长但是在进一步做PCR验证时（扩增目的基因）,却又发现在相应大小750bp处没有条带,只有引物
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/09 14:21:54
在做制备感受态细胞DH5a时,将含有pET-GFP的基因转化给了DH5a,转化后的DH5a确实能够在含Kan的平板上生长但是在进一步做PCR验证时（扩增目的基因）,却又发现在相应大小750bp处没有条带,只有引物
在做制备感受态细胞DH5a时,将含有pET-GFP的基因转化给了DH5a,转化后的DH5a确实能够在含Kan的平板上生长
但是在进一步做PCR验证时（扩增目的基因）,却又发现在相应大小750bp处没有条带,只有引物二聚体,这是为什么?应该可以排除PCR设定条件的问题,因为跟我同组的人都P出来了,就我没有目的条带.
在做制备感受态细胞DH5a时,将含有pET-GFP的基因转化给了DH5a,转化后的DH5a确实能够在含Kan的平板上生长但是在进一步做PCR验证时（扩增目的基因）,却又发现在相应大小750bp处没有条带,只有引物
你确定是Kan抗性吗?如果你的确实是kan的话,平板克隆假阳性的情况很常见.关键PCR设好阳性对照,如果阳性对照有目的条带,而挑的克隆没有,就能说明是假阳性克隆.另外,可以多挑几个克隆,我一般都会挑10-20个.
印象中，PET系列的质粒一般都转化BL21细胞吧？还要看你的pet质粒是那个系列的，有的是amp抗性，有的是kana抗性，不定都是kana 的抗性。
在做制备感受态细胞DH5a时,将含有pET-GFP的基因转化给了DH5a,转化后的DH5a确实能够在含Kan的平板上生长但是在进一步做PCR验证时（扩增目的基因）,却又发现在相应大小750bp处没有条带,只有引物
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