DNA酶切之后,产物直接电泳,胶回收之后的产物中酶还有活性吗?没有用EDTA终止反应,电泳和胶回收会使酶失活吗?现在取胶回收产物进行连接转化,转化效率底,平板上未见菌落.怀疑是胶回收的载

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 07:05:47

DNA酶切之后,产物直接电泳,胶回收之后的产物中酶还有活性吗?没有用EDTA终止反应,电泳和胶回收会使酶失活吗?现在取胶回收产物进行连接转化,转化效率底,平板上未见菌落.怀疑是胶回收的载
DNA酶切之后,产物直接电泳,胶回收之后的产物中酶还有活性吗?
没有用EDTA终止反应,电泳和胶回收会使酶失活吗?现在取胶回收产物进行连接转化,转化效率底,平板上未见菌落.怀疑是胶回收的载体中还有酶的活性

DNA酶切之后,产物直接电泳,胶回收之后的产物中酶还有活性吗?没有用EDTA终止反应,电泳和胶回收会使酶失活吗?现在取胶回收产物进行连接转化,转化效率底,平板上未见菌落.怀疑是胶回收的载
你做胶回收的那个柱子,只吸附DNA,就算有蛋白和其他杂质也在胶回收步骤中洗掉了,转化效率低一般不会是这个原因.
你先看看这些步骤有没有需要优化:
1.连接体系:粘末端是否匹配,载体与片段的比例、多少,Buffer,酶量,等等,可以参照连接酶的说明书.
2.转化体系:连接产物不要超过感受态量的10%,加入时不要吹打.
3.如果是自制的感受态,看一下转化效率,是否反复冻融,或者在室温放置较长时间.实验操作是否遵守流程等等.
4.确认一遍载体的抗性和培养基的抗性.

DNA酶切之后,产物直接电泳,胶回收之后的产物中酶还有活性吗?没有用EDTA终止反应,电泳和胶回收会使酶失活吗?现在取胶回收产物进行连接转化,转化效率底,平板上未见菌落.怀疑是胶回收的载 DNA胶回收电泳有目的条带,但是测OD值时去测不出来?请问这究竟是什么原因?菌落PCR之后进行胶回收的!亮的两条带是回收之前,其他都是回收之后电泳结果. 电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么 PCR后电泳有清晰条带,回收之后酶切,再电泳就没有条带了,怎么回事?PCR后电泳有清晰目的条带,回收之后酶切,再电泳就没有条带了,怎么回事?大概有几种可能性?这个实验本来是别人做的,因为 植物DNA和质粒DNA酶切产物电泳后带型不同的原因 变性PAGE电泳后的DNA能够切胶回收做测序吗?比如DGGE后的DNA条带. 关于PCR反应液纯化回收后再电泳的问题如题 我跑RACE 每一次PCR的反应液用TAKARA miniBEST 的纯化Kit回收 回收之后的溶液和后续的巢式PCR产物一起跑电泳 这样才能对比结果可是每次在加样的时候 做双酶切时,有没有人出现胶回收的DNA产物与酶切缓冲液混合温浴后跑不出条带的现象? 为什么胶回收试剂盒回收的DNA电泳后一点东西都没有 电泳切胶回收点样多少? 电泳切胶回收点样多少? 透析电泳没有回收到DNA 酶切产物/PCR产物回收 电泳之后是不是可以导电? 矿泉水瓶回收之后的作用? 运载火箭 发射之后怎么回收 今天准备DNA电泳,点样之后刚开始跑就停电了!该怎么保存我的胶啊?天煞的物业,就会停电 载体酶切产物电泳时检测胶上有条带,回收胶上却降解了,请教各位大虾这是怎么回事?两块胶同时跑的电泳- -! 在紫外下看不到条带,糊的 一片亮