菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的!

菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的! 为什么每次做转化后菌落PCR有带,但是提质粒后就P不出. 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 关于T-A克隆的一些问题我做完了T-A克隆,提取质粒以后,用我的目的基因引物做PCR,跑电泳跑出来了目的条带,但是有一些杂带,是怎么回事呢. 重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一PCR扩增出1kb的带，双酶切(3h)切出的是2kb的带，和载体相比，切出的带不亮，有的根本看不清，可能是目的片段不浓，如果是质粒不纯，我是从单菌落来 我的片段转入ppicza载体后转化到DH5a里,菌落PCR验证成功,为何就是提不出质粒? 最近做了连接转化,挑平板上的菌落摇菌后提质粒,单酶切可以切开,而且质粒的大小明显小于空质粒然后用质粒稀释100倍后进行PCR,可以看到目的条带,但是有拖带.然后我继续将质粒稀释至500倍, 什么是lamda DNA?和质粒DNA有什么区别?pcr的聚合酶说可以扩增8kb的lamda DNA,没说质粒DNA.那我要pcr质粒的一个片段可以扩增多大的片段? PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同，通用引物和自身引物开始都能得 质粒双酶切质粒大小正确,菌落PCR,也有条带,但是双酶切就是不成功,有什么建议吗? （鉴定质粒表达）比较菌落PCR和提质粒酶切这两种方法的优缺点,为什么需要两次鉴定? 质粒提取试剂盒和核酸提取试剂盒一样吗?我要提取细菌16SrDNA 然后PCR 用哪种比较好?如题,我是第一次做实验 很多都不懂,要买DNA提取试剂盒 但是都不知道该买哪种我们医院有质粒的 但是我不 提取质粒的时候应该加Buffer pcr-a 可是加成了buffer-s1怎么办呀有什么补救吗 用takara的酵母菌DNA提取试剂盒提取rDNA,PCR后跑电泳总没结果,出现火星带,没有条带,怎么回事? 质粒提取p2没加 直接加p3请问还有挽救的机会吗 我刚怀孕一个月 然后在从事分子实验 测序,质粒提取pcr对孩子好吗?什么EDTA,分子测序,质粒提取pcr对孩子好吗? 质粒转化大肠杆菌后涂平板长出的菌落出现较规则的大小两种菌落 可以继续进行质粒提取吗?