做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?用marker标记 western blot转膜时 电流330mA,转膜1小时后 膜上没有marker的条带请问这是为什么呢?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 05:21:40

做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?用marker标记 western blot转膜时 电流330mA,转膜1小时后 膜上没有marker的条带请问这是为什么呢?
做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?
用marker标记 western blot转膜时 电流330mA,转膜1小时后 膜上没有marker的条带请问这是为什么呢?

做western blot时为什么转膜后膜上没有蛋白?用marker标记 western blot转膜时 电流330mA,转膜1小时后 膜上没有marker的条带请问这是为什么呢?
只看marker也不可靠吧?还是用ponseau S (丽春红)给膜上的蛋白质显色看一下到底如何.
另外膜上没有marker的话,胶上还看得到marker吗?如果还在胶上,那么蛋白质可能也还在胶上,可以改变电流和时间重做一遍.
如果胶上膜上都没有,那搞不好就跟二楼说的一样,正负极接反,样品全跑到缓冲液里去了.

正负电极搞错了吧?

没接电或者正负极接反了~~然后就是转移盒的正反面弄翻了~~自己看着办吧~~

首先确定电流正负极没有接反。然后对胶和膜都进行染色,看看是不是有蛋白。同时查看滤纸上是不是有印。降低电流和/或时间再看看。