作业帮PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/27 09:20:10
PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出
PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的
假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出引物.但是,我最后得到了PCR的产物,我怎么确保我克隆出来的这段产物基因和老鼠的那段基因是一样的序列呢?
PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出
将PCR产物凝胶电泳,切割回收DNA长度近似的条带（凝胶回收）,将回收提纯的DNA克隆至质粒载体（先酶切再连接）,将载体转化至细菌扩增,提取质粒,利用质粒上已知序列作为因为对目的DNA测序,利用Blast比对测序产物与老鼠基因的近似性.这是基因工程的一般通用步骤.
回答你问上面的问题,你可能没有真正接触过分子方向的实验,你说的荧光标记在理论上可行,但是成本太高,而且探针只能测定部分序列,无法对DNA全序列进行比对,综合成本及效率,测序最为省力.当然,你也可以用酶切做一个基本判断,如果基因的同源性很高,可以不用测序.
把PCR产物重组到T载体上，然后再转化到细菌中。再测序。再在网上跟老鼠的基因比对。
最快的方法是将两者的基因进行杂交，要不然就得测序比对啦
。。。。。。。。扯淡的真多
一楼说的重组根本不需要，你只是想知道这个序列是不是目的序列的话直接把PCR产物寄给测序公司测序，花25块钱，等两三天出结果就行了。还搞什么酶切、荧光，不嫌累么？额，可不可以请问一下，怎么提取PCR的产物？...
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。。。。。。。。扯淡的真多
一楼说的重组根本不需要，你只是想知道这个序列是不是目的序列的话直接把PCR产物寄给测序公司测序，花25块钱，等两三天出结果就行了。还搞什么酶切、荧光，不嫌累么？
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同源克隆我们一般都是测序，然后将序列与genebank下面的序列进行比对。。。同源性大于70%的话应该就是你要的基因
一般是通过测序，这是目前比较靠谱的做法，把你扩增的片段回收，连接到买来的T载体上，做转化实验，把最后得到的菌液送测序公司就可以了，得到的结果再与你之前有的老鼠的基因序列进行比较就可以了，可以用DNAMAN。