作业帮Pierce 试剂是什么
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/11 03:24:12
Pierce 试剂是什么
Pierce 试剂是什么
Pierce 试剂是什么
BCA蛋白定量试剂盒(美国Pierce公司)
原理简介
BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成.众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子（biuret reaction）,一价铜离子和独特的BCA Solution A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应.两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物.该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度.
产品特点
1．步骤简单,45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便.
2．灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl .
3．BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80.
4．在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系.
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量.
BCA蛋白质定量检测试剂
在蛋白质的表达纯化,结构和功能的研究工作中,蛋白质的定量随处可见.但是,什么是理想的蛋白质定量方法?如何准确、快速的对蛋白质进行定量,对于不同的样本,如何选取相应的蛋白质定量试剂和方案?如何避免实验中引入的其它物质对蛋白质定量的干扰,PIERCE为这一切提供了可以信赖的解决方案.
PIERCE的BCA(bicinchoninic acid)蛋白质检测试剂是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品.该方法以快速灵敏、稳定可靠且对不同种类蛋白质变异系数甚小而深受专业人士的青睐.其中MicroBCA产品可检测到0.5μg/ml的微量蛋白,是目前已知的最灵敏的蛋白质检测试剂之一.
主要特点：
· 准确灵敏：BCA试剂的蛋白质测定范围是20－2000μg/ml,采用加强方法可检测到
5μg/ml；MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml.
· 快速：45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便.
· 经济实用：除试管外,测定可在微孔板中进行,大大节约样品和试剂用量.
· 不受样品中离子型和非离子型去污剂影响.
· 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考玛斯亮蓝.
基本原理：
碱性条件下,蛋白将Cu++还原为Cu+,Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度.
BCA分子式：
原理图：
用PIERCE的BCA试剂盒所得的标准曲线：
MicroBCA蛋白标准曲线
BCA蛋白标准曲线
BCA蛋白质检测流程：