PCR程序中的退火温度和循环次数受哪些因素影响

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/29 11:08:55

PCR程序中的退火温度和循环次数受哪些因素影响
PCR程序中的退火温度和循环次数受哪些因素影响

PCR程序中的退火温度和循环次数受哪些因素影响
退火温度基本和引物有关,如果产物特异性不好,可以适当提高退火温度.
循环次数是你自己定的,如果模板量低（产物量少）就多循环几圈,不过最好别超过35个,里边的成分都耗损的差不多了.再循环也没大用了.

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退火(复性)温度与时间：退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃～60℃，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸，G+C含量约50%的引物，55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度： Tm值(解链温度)=4(G+C)＋2(A+T) 复性温度=Tm值-(5～10℃) 在Tm值允许范围内，选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。

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PCR程序中的退火温度和循环次数受哪些因素影响退火温度递减的PCR程序叫什么比如PCR退火温度是55 然后每个循环退火温度降低1度知道引物如何求退火温度和循环次数如何确定pcr反应中的退火温度和延长时间如何确定PCR反应中的退火温度和延长时间? 请问,PCR中的复性就是退火吗?复性温度和退火温度有什么区别啊? 如何优化pcr反应中的退火温度 pcr退火温度怎么确定? pcr退火温度怎么确定 PCR退火温度不稳定是什么原因? PCR退火温度不稳定是什么原因? PCR反应的循环前和循环后的温度和时间做pcr除了必要的变性,退火,延伸的温度和时间,还需要在循环之前设定一个温度和时间,循环完成之后也要设定个温度和时间,最后还有个保存的时间,我想 pcr产物电泳时,用反转的dna的同一个样分别扩内参、目的1和目的2.内参和目的1都很好,目的2却很浅很浅?三者因所用退火温度,循环数不同,是分三次分别扩增的.之后电泳结果时内参和1非常好,2 pcr退火温度一般为多少? ISSR-PCR的退火温度怎么设计? 如何优化PCR反应中退火温度 PCR的退火温度怎么设定 pcr退火温度一般为多少?