低熔点琼脂糖凝胶怎么配制?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/08 03:40:20

低熔点琼脂糖凝胶怎么配制?
低熔点琼脂糖凝胶怎么配制?

低熔点琼脂糖凝胶怎么配制?
琼脂糖凝胶的配制
⑴琼脂糖凝胶的制备：称取0.3g琼脂糖,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE缓液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE缓液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE缓液,将该三角瓶置于微波炉加热至琼脂糖溶解.将冷却至65℃左右的琼脂糖凝胶液,加入溴化乙锭,充分混匀.
⑵胶板的制备：
①取有机玻璃内槽,洗净、晾干；
②将有机玻璃内槽置于一水平位置模具上,安好挡板,放好梳子.吸取少量琼脂糖溶液封固胶膜边缘,任其凝固,在距离底板0.5～1.0mm的位置上放置梳子,以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔.如果梳子距离玻璃板再近,则拔出梳子时孔底将有破裂的危险,破裂后将使样品在凝胶与玻璃板之间渗漏.
③将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶膜中,使胶液缓慢地展开,直到在整个有机玻璃板表面形成均匀的胶层.凝胶的厚度在3～5mm之间,检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡.
④室温下静置30min左右,待凝固完全后,轻轻拔出梳子,在胶板上即形成相互隔开的上样孔.制好胶后将铺胶的有机玻璃内槽放在含有0.5～1×TAE（Tris-乙酸） 或TBE（Tris-硼酸）工作液的电泳槽中使用,没过胶面1mm以上.
（注：溴化乙锭是一种强烈的诱变剂并有中度毒性.使用含有该染料的溶液时必须戴手套.使用完后应该进行净化处理.通常用水配制成10mg／ml的贮存液在室温下避光储存,使用终浓度为0.5μg／ml.）

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