巢式PCR扩增阴性对照有非特异性扩增第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/10 06:09:34

巢式PCR扩增阴性对照有非特异性扩增第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照
巢式PCR扩增阴性对照有非特异性扩增
第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照
第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照
第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照产物做的模板,按理说不应该有那个100bp的抹带.如果是非特那4、5泳道却没有.引物二聚体也不应该有100bp大吧~
这个是什么,应该怎么消除

巢式PCR扩增阴性对照有非特异性扩增第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照
应该是引物的延伸性dimer,看弥散程度不像是条带,你可能要看下你第一轮和第二轮引物之间会不会有extensible primer-dimer,毕竟你用的阴性对照产物做模板,里面虽然没有DNA,但是有你第一轮扩增的引物.而你第一轮后阴性对照里的引物浓度肯定高于阳性对照,所以阳性对照没有这个条带也可以这样解释.
如果想消除的话可以提高一下退火温度,或者换一个热启动的酶,要不就换下引物.
不知道你试验要做什么,如果是回收测序的话,这样的条带又不在目标附近,反正要胶回收的,不用变什么也没问题.
我是这么认为的.

巢式PCR扩增阴性对照有非特异性扩增第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照 巢式PCR,阴性对照出现非特异性扩增问题第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对 什么是PCR技术的非特异性扩增? PCR后出现非特异性扩增是什么原因? 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 PCR扩增时出现特异性带和非特异性带?我想问什么是特异性带?什么是非特异性带? 如果PCR没有任何扩增产物或产生许多非特异性产物,应如何分析解决 PCR复性温度如何确定为什么要在最后延伸10min?是否有非特异性扩增产物(或引物二聚体),如何消除? pcr 阴性对照孔32个循环开始出现扩增怎么回事 进行PCR扩增为什么扩不出目的片段?就连非特异性条带也没有,引物与模板分得清清楚楚 PCR反应有非特异性扩增怎么办PCR后跑胶,发现有非特异扩增,亮度比目的片段小,该怎么办呢?接下来要做酶切…谢谢!除了切胶纯化外,还有没有别的方法,比如通过调节PCR反应的条件( 单引物PCR对照的原理为什么有时候做PCR要做单引物扩增对照?和阴性对照的差异是什么?有什么意义?单引物扩增有条带和没条带分别说明啥?应该要怎样才是对的?我做了一次PCR..单引物双引物和 一对引物扩增条带竟然有两条,除了非特异性扩增的可能还有别的原因么?大家有没遇到这种情况啊? RT PCR实验 结果出现非特异性扩增 图像如果显示?它的原因和图像出现拖尾的原因一样吗? pcr扩增,这张DNA琼脂糖电泳图怎么了?从左往右:A样本、B样本、阴性对照的beta actin;A样本、B样本、阴性对照的gene1;样本、阴性对照的gene2. PCR扩增不出就引物有问题吗? pcr扩增仪有什么作用 PCR扩增不出就引物有问题吗?