HPLC 色谱柱有哪些?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/15 11:39:01

HPLC 色谱柱有哪些?
HPLC 色谱柱有哪些?

HPLC 色谱柱有哪些?
常用的HPLC色谱柱多为硅胶基质填料的,又分正相色谱柱和反相色谱柱两大类.其它填料的色谱柱还有聚合物填料的和无机填料的,应用较少,我也了解不多,在此不加描述了.
1、正相色谱
正相色谱用的固定相通常为硅胶以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料.由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱.正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等.
2、反向色谱
反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相.反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物.样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留.常用的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等.

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