我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/01 15:30:41

我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色
我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS
代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色.不知道什么原因.我怀疑是细胞中可能有可以和一抗反应的物质.不知道到底什么原因.

我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色
如果293T本身不表达这个蛋白的话,最大的可能是一抗质量不过关
你可以做一下免疫印迹看看.免疫组化假阳性多正常(非特异性吸附).
免疫印迹Western blotting用分子量大小来判断,很难出假的.

是目的基因的抗体做的么?
是不是293T本身表达这个蛋白?

赢润生物技术支持 孙永林 加QQ12695920

我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色 基因表达载体的构建 质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒(构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA),转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操 共转染是将两个基因构建到一个载体上,再转染的意思吗,还是两个基因构建到两个载体,再将两个载体转染?但是质粒不相容啊,可以转两个质粒到同一细胞吗? 您好,瞬时转染所用的质粒是病毒载体质粒还是真核表达载体质粒? 我已经有含有目的基因的T质粒了,怎样构建表达载体啊? 如何构建某一个基因的原核表达载体 关于真核载体的构建真核载体的构建的要点和基本原则是什么表达载体 pcsk9基因功能获得型和缺失型突变真核表达载体的构建及初步鉴定 肖文虎2010年的论文 谁有发个给我啊? 怎么样构建基因表达载体 基因表达载体构建步骤 关于载体构建的问题我要构建一个GFP表达载体标记人体骨髓间充质干细胞的黏着斑,我想问一下这个载体的目的基因怎么获得?质粒载体用哪种比较好? 如何构建一个能高效表达目的基因的表达型载体 转染真核表达载体后需要将载体线性化吗? 基因表达载体的构建所需的条件 基因工程构建基因表达载体用到质粒的原因 构建基因表达载体的原因最好是专业语言, 构建基因表达载体时的启动子是啥作用?