PCR克隆中GC含量高如何扩出?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/09 06:16:45

PCR克隆中GC含量高如何扩出?
PCR克隆中GC含量高如何扩出?

PCR克隆中GC含量高如何扩出?
1）一般的公司有提供专门扩增高GC序列的酶和buffer提供,可以考虑,我们用宝生物的LA酶和GCbuffer
2）可以将序列扩增长一些,避免引物GC含量过高的区域,2步克隆
3）反应中加入DMSO等改进方法也是可行的,但对GC>75%的可能没有效果的
4）序列不长的话,可以考虑人工合成

高GC或者长片段的一般难度较大，可外包给专业的生物技术服务公司。Q12695920

在反应Buffer中加一定含量的DMSO或DTT，可以减少模板二聚体的形成。

PCR克隆中GC含量高如何扩出? gc含量高pcr应该怎么扩 gc含量高pcr应该怎么扩 PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高（75％）的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高（大于80％）,但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终 PCR引物GC含量过低时候,如何调整PCR体系? GC含量太高会怎么样引物GC含量太高会对pcr产生什么影响啊? 如何确保pcr产物以正确的方向克隆到表达载体中 (未翻译方向) 什么原因造成GC含量高 遇到GC含量高而难以完全变性的样品该如何处理? 用MEGA 如何计算GC含量 从克隆载体上PCR出目的基因原理 PCR扩增时,序列AT含量太高如何设计引物? PCR技术如何计算DNA含量 GC含量的高低对PCR有什么影响啊?对PCR的成功率有什么影响? 为什么说gc含量高的dna变性温度高 小麦种GC含量高,说明了什么? 已知氨基酸序列,如何克隆出基因 PCR中的GC-clamps是什么意思