PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/27 22:10:49

PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终
PCR扩增gc含量很高的序列
我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终止子上.
请问对于设计引物和pcr扩增有什么好的建议.

PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终
没事,照常扩吧
gc buffer ,然后可以引物退火温度高一些,60以上.采用2步法试试

用TaKaRa的GC buffer进行扩增就行了。还有其他很多生物公司都有各自的GC buffer的,可以改善高GC下的PCR效率(一般GC在85%以上都可以有效扩增)。

PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终 PCR克隆中GC含量高如何扩出? 我要扩增一个基因GC含量较高,我想用GC buffer试试 现在用的是master mix 酶,buffer是否能与master mix 酶同用? PCR扩增时,序列AT含量太高如何设计引物? 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? gc含量高pcr应该怎么扩 gc含量高pcr应该怎么扩 如果要使用PCR扩增一段已知的DNA序列,要如何设计引物 pcr条件设定:我要p一个2000+bp的片段 pcr条件怎样设我的两个引物都是33bp GC含量为43% p过两次 都是引物二聚体 PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增.设计一个引物,下游设计一个引物,上下游引物间想穿插(包含一定共同片段),这样成吗. 我是想扩增其侧翼序列,但是它整个序列AT含量很高,不知道怎么设计引物呢 DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 在DGGE实验中,胶回收后要测序前的PCR扩增时引物必须为不带GC夹子的吗?我用带GC夹子在DGGE实验中,胶回收后要测序前的PCR扩增时引物必须为不带GC夹子的吗?我用带GC夹子的扩增了,有三个条 知道一个基因两端的序列,中间有一段未知,用哪种PCR法把未知片段扩增出来啊? 如何分析基因序列GC含量.想要知道某序列的GC含量,要如何操作?是用什么软件,还是在哪个网站上? 我提取RNA,反转录得到cDNA,我要由此扩增功能基因,请问引物设计时,用查到的mRNA序列,还是用cDNA序列我要克隆一个基因,从NCBI查到该基因近似物种的mRNA(没有查到cDNA).我的路线是先提取RNA,反转录 请问在ncbi上blast的时候,需要去除pcr扩增引物序列吗?如题,在blast的时候是否要保留当时做dna扩增时的pcr引物序列.……以前做的一个系列是通过提取重组质粒测序,不去引物的,但是现在做的内 设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度我的引物gc含量大约为0.6 因为是设计的同源臂 所以比较长